1.分光光度計(jì)的原理
分光光度計(jì)主要由光源、單色器、狹縫、比色池、光電轉(zhuǎn)換和數(shù)值顯示等部分組成。分光光度計(jì)的工作過(guò)程如下：光線(xiàn)通過(guò)一個(gè)狹縫或一個(gè)準(zhǔn)直鏡投向單色器，單色器可以是一個(gè)棱鏡也可以是一個(gè)光柵，某類(lèi)簡(jiǎn)單儀器還可以是一片濾光片。光線(xiàn)在這里被分解為一個(gè)連續(xù)的色帶，或被過(guò)濾成具有一定譜帶寬度的單色光。狹縫的作用是在連續(xù)的色帶上截取一小段光譜，因而狹縫的大小或單色器的位置都影響單色光的純度或譜帶的寬度。光線(xiàn)通過(guò)比色池后投向半導(dǎo)體光電池、光電管或光電倍增管，使光信號(hào)變成電信號(hào)，微弱的電信號(hào)經(jīng)放大處理和數(shù)字處理后送給顯示器顯示。
2.光源燈的更換
多數(shù)光度計(jì)的光源由一只6V或者12V、10W 或30W的溴鎢燈，承擔(dān)有紫外光部分的還要增加一只氘燈。這些光源在使用一段時(shí)間后會(huì)老化，表現(xiàn)為亮度下降，這時(shí)就要更換一只電壓、瓦數(shù)及形狀相同的燈泡，平日也不應(yīng)將儀器的透光率(T)調(diào)至百分之百。由于每種燈泡的幾何尺寸不可能完全一致，更換時(shí)有必要調(diào)整燈的位置。氘燈的更換和溴鎢燈不太一樣，需要把卡紙放在入射光處調(diào)節(jié)燈的位置使圓型光斑最圓最亮且要處于中心位置。每次更換燈泡后還要做波長(zhǎng)的校正，可見(jiàn)光部分用鐠釹玻璃濾光片529 nm, 吸收峰來(lái)校正在5-10 nm內(nèi)，吸收示值最大點(diǎn)是529 nm 實(shí)際波長(zhǎng)，實(shí)際波長(zhǎng)刻度也要在儀器允許誤差范圍內(nèi)。校正波長(zhǎng)后，還要測(cè)試新光源的穩(wěn)定性。方法是用一濾光片插人比色杯架中間，機(jī)器預(yù)熱30 min，然后間隔時(shí)間連續(xù)讀數(shù)并觀(guān)察讀數(shù)的變化是否符合儀器的出廠(chǎng)標(biāo)準(zhǔn)。如讀數(shù)重復(fù)性較差需重新更換燈泡并重復(fù)以上工作。紫外光部分方法基本與可見(jiàn)光相同，不同點(diǎn)是利用氘燈的特征譜線(xiàn)486.0 nm和656.1 nm 進(jìn)行校正。先將波長(zhǎng)調(diào)至待測(cè)波長(zhǎng)附近，再將透光率t調(diào)至50%后緩緩增加或減少波長(zhǎng)，同時(shí)觀(guān)察透光率的變化，在待測(cè)波長(zhǎng)附近透光率最高一點(diǎn)便是正確的波長(zhǎng)位置。要特別注意在更換燈泡時(shí)一定要帶上棉手套，以免讓指印污染燈泡表面影響了燈泡亮度。
3.光電元件的更換
光電元件在加電的情況下受到強(qiáng)光照射很可能造成不可逆的損壞，這是由于過(guò)量的光子激發(fā)使光電極表面有過(guò)量的電子逸出而加速了光電極老化造成的。因而在更換各類(lèi)光電元件時(shí)，不能在加電的情況下進(jìn)行且要避免強(qiáng)光直接照射。—般的情況下，光電元件是裝置在一個(gè)密封完好的黑匣中，它既可防潮，也可避免雜散光。但它輸出阻抗非常高，稍受潮濕便發(fā)生漏電，造成電路的不穩(wěn)定、儀器不能正常工作。因此，更換光電元件時(shí)，要注意防潮。電真空一類(lèi)的光電元件比較嬌氣，不宜久存，最好現(xiàn)購(gòu)現(xiàn)用。如果需要儲(chǔ)備，要注意避光和防潮。
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